An exploratory study on bioactive constituents from the sponge Coscinoderma sp.

Abstract

해면동물 Coscinoderma. sp. 시료를 methylene chloride와 methanol로 추출하여 조추출물을 얻었으며 이 조추출물을 용매 극성도에 따라 분획하여 4가지 용매분획층들인 n-hexane, 85% aqueous methanol (85% aq.MeOH), n-butanol (n-BuOH), water 분획층을 얻었다. 이렇게 얻어진 조추출물과 용매분획층에 대한 항산화활성, 암세포 증식억제 활성, 그리고 항염증활성을 검색하였다.

항산화활성 검색은 DPPH radical, peroxynitrite (ONOO-), 그리고 세포내 ROS (reactive oxygen species)에 대한 소거효과와 ferric ion에 대한 환원력을 측정하였다. 전반적으로 85% aq.MeOH과 n-BuOH 분획층에서 유의한 항산화효과가 관측되었다. DPPH radical 소거활성은 85% aq.MeOH과 n-BuOH 분획층이 유의적인 소거효과를 보여주었으나 n-BuOH 분획층이 좀 더 높은 소거효과를 나타내었다. Peroxynitrite에 대해서도 85% aq.MeOH과 n-BuOH 분획층이 높은 소거효과를 보여 주었다 하지만 ferric ion에 대한 환원력 측정에 있어서는 85% aq.MeOH과 n-BuOH 분획층이 농도의존적인 환원력을 나타내었으나 효과가 뛰어나지는 못하였다. HT-1080 세포내에 생성된 ROS의 소거활성실험에서는 water층을 제외한 모든 용매분획층들이 높은 소거능을 보여주었으나 그 중에서 n-BuOH 분획층이 가장 좋은 소거능을 나타내었다. 이 뿐만 아니라 lipopolysaccharide (LPS)로 자극된 Raw 264.7 cells에서 생성되는 nitric oxide (NO․)에 대해서도 모든 용매분획들이 농도의존적으로 억제효과를 나타내었으나 그 중에서 n-BuOH 분획층이 가장 좋은 NO 생성억제 효과를 나타내었다. 또한 염증매개인자들인 iNOS, COX-2, IL-1β, IL-6, TNF-α의 mRNA 발현측정에서 85% aq.MeOH과 n-BuOH 분획층이 좋은 발현 억제효과를 나타내었다. 인체 암세포들에 대한 증식억제실험에서 모든 용매분획들이 모든 암세포들(HT-1080, AGS, HT-29 및 MCF-7)에 대해 농도의존적인 증식억제효과를 나타내었으나 그 효과는 높지 않았으며 n-BuOH 분획층이 상대적으로 비교적 좋은 효과를 나타내었다.

생리활성 스크리닝 결과가 가장 좋은 n-BuOH 분획층으로부터 sesterterpene 유도체인 Halisulfate 1 (1)과 3개의 nucleoside인 2’-Deoxyadenosine (7), 2’-Deoxyuridine (8), Thymidine (9)을 분리하였으며 85% aq.MeOH 분획층에서는 sesterterpene 유도체인 Halisulfate 2 (2)를 분리하였다. 또 n-hexane 분획층으로부터는 epidioxysteroide 유도체들인 (24S)-5,8-epidioxy-24-methylcholest- 6-en-3β-ol (3), 5α,8α-epidioxycholesta-6,22-dien-3β-o1 (4), 5α,8α- epidioxy- cholesta-6-en-3β-o1 (5)그리고 5α,8α-epidioxy-24- methylcholest -6,9(11)- dien-3β-ol (6)이 분리되었다.

분리된 화합물들(1-9)에 대한 항산화, 항염증, 암세포 증식억제 활성을 측정하였으며 halisulfates 1 (1)과 2 (2)가 비교적 좋은 항산화 활성을 나타내었다. 하지만 항염증이나 암세포 증식억제에 있어서는 농도의존적인 억제효과는 관측되었지만 주목할만한 유의적인 활성을 보여주지는 못하였다.